当天下午,实验室就进入了紧急状态
温院士把珍藏的超低温萃取手册找了出来,司夜宴联系了材料研究所,调来了最新的纳米过滤膜
江妄甚至让纽约的团队远程指导,提供了三种备选方案
林清欢站在操作台前,盯着屏幕上的多糖分子模型
这种分子像串脆弱的珍珠,每个糖苷键都像根细丝线,稍微加热或震荡就会断裂
常规的萃取方法是用乙醇沉淀,但乙醇会破坏分子间的氢键
这正是难点所在
“或许可以用超临界流体萃取”
温院士指着手册上的某一页,“二氧化碳在超临界状态下既有气体的渗透性,又有液体的溶解能力,不会破坏糖苷键”
“但需要精准控制温度和压力”
林清欢调出设备参数,“我们的萃取仪最大压力只能到30mpa,而这种多糖需要45mpa才能完全溶解”
司夜宴突然开口:“我知道军工研究所有种高压反应釜,压力能到60mpa,我现在去借”
“等等”
林清欢叫住他,“压力太高会导致分子聚合我想到了,用低温酶解结合离心分配色谱”
她在白板上快速演算,“先用复合酶分解孢子细胞壁,温度控制在0c以下,避免多糖活性受损”
“然后用离心分配色谱分离,这种方法不需要固态吸附剂,能减少90%的机械损伤”
温院士眼睛一亮:“这思路可行!但离心分配色谱的溶剂体系很难配,稍有偏差就会影响分离效果”
“我在y国做访问学者时,做过类似的溶剂配比”
林清欢调出一个加密文件夹,“这是当时的实验记录,正丁醇-乙酸乙酯-水,比例3:2:5,ph值控制在5.2”
夜幕降临时,实验室依旧灯火通明
江妄派来的工程师调试好了进口的低温离心机,司夜宴借来的高压反应釜也安装完毕
林清欢穿着防护服,正在无菌操作间里处理孢子样本,她的动作精准得像台仪器
用微量移液器吸取0.5ml的酶溶液,滴入培养皿时,液滴在灯光下划出一道晶莹的弧线,不多不少,正好覆盖整个样本表面
凌晨三点,第一阶段的酶解完成
当离心分配色谱仪开始运转时,所有人都屏住了呼吸
仪器屏幕上的分离曲线像条跳动的绿线,每个峰值都代表着一种成分
林清欢紧盯着那个代表目标多糖的峰值,指尖因为用力而泛白
“分离度98.7%!”负责监测的研究生突然欢呼起来,“林组长,成功了!”
林清欢长舒一口气,后背已经被汗水浸湿
但这只是第一步,接下来的纯度检测才是关键
她将萃取物注入高效液相色谱仪,看着屏幕上逐渐浮现的单峰
峰形对称,没有任何杂峰干扰
“纯度99.2%!”
温院士推了推眼镜,声音里带着激动,“糖苷键完整率……需要用核磁共振确认”
当核磁共振仪的结果出来时,天边已经泛起鱼肚白
图谱上的特征峰清晰锐利,每个糖苷键的化学位移都完美匹配标准图谱
计算软件弹出的最终结果让所有人都沸腾了!
完整率96.3%!
清晨八点,艾伦教授带着西蒙和佐藤准时出现在实验室,脸上还带着看好戏的笑容